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一种红豆杉悬浮细胞包埋玻璃化超低温保存方法
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专利申请号:CN201511022867.8

专利公开号:CN105638645B

发明人:熊兴耀,李炎林,苏小军,张家银

摘要:本发明公开了一种红豆杉悬浮细胞包埋玻璃化超低温保存方法。包括:(1)红豆杉愈伤组织的悬浮培养:挑取培养15d的白色或者淡黄色的愈伤组织,使用改良的MS‑I号培养基;(2)红豆杉细胞系悬浮预培养:使用改良的MS‑II号培养基预培养1天;(3)包埋;(4)预处理:用预装载液LB7处理胶球30~60分钟;(5)装载:用PVS3对胶球处理30~60分钟;(6)冷冻保存;(7)解冻:用45℃恒温水浴1分钟左右化冻;(8)恢复培养,在6周左右可以恢复生长。本发明方法操作简单易行,且恢复生长时间短,适合大规模的红豆杉种质资源的保存,方法适合多种红豆杉细胞系的保存,具有广谱的适应性。

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