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本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪瘟病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白与猪瘟病毒E2蛋白的E2‑E0融合蛋白，不仅能够促进E0蛋白的表达，而且不影响E0蛋白和E2蛋白的免疫原性，可用于猪瘟亚单位疫苗的制备；在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将猪瘟病毒E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G，能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升20％以上，且不影响其免疫原性。
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