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本发明公开了ASFV检测试剂盒及其引物探针组合物与应用。本发明具体地公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，所述试剂盒包含引物ASF‑RPA‑F1和引物ASF‑RPA‑R1或引物ASF‑RPA‑R2，还包含SEQ ID No.4‑29所示的至少任一种p17‑crRNA以及探针FAM‑N‑BHQ2。本发明建立的快速、精准、可视化且低成本的非洲猪瘟病毒的检测方法结合了RPA技术与Cas12a酶切技术，可以高效、灵敏、特异、精准地判定待测样品中是否含有非洲猪瘟病毒，为严格控制ASFV的传播提供了强有力的检测工具，具有重要的经济效益与社会价值。
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